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冻存液怎么配置?

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发表于 2015-9-21 15:39:03 | 显示全部楼层 |阅读模式
冻存液怎么配置?有些书上说,可以用50%的小牛血清(RPMI1640)+DMSO,但问了其他一些同学,他们就直接用100%小牛血清+DMSO, 我刚接触细胞培养,请问各位前辈,这个小牛血清浓度不同,有什么区别么?

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发表于 2015-9-22 16:26:00 | 显示全部楼层
我们实验室有两种:短期冻存的用70%培养基(有无血清均可)+20%血清+10%DMSO作为冻存液;长期冻存90%血清+10%DMSO作为冻存液,;冻存液提前20min配好,因为DMSO溶于水会发热,等到降至37℃一下再加细胞。

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发表于 2015-9-23 15:52:37 | 显示全部楼层
陈志从 发表于 2015-9-22 16:26
我们实验室有两种:短期冻存的用70%培养基(有无血清均可)+20%血清+10%DMSO作为冻存液;长期冻存90%血清+1 ...

我们课题组和你们短期的配置方法一样,不过请问你们定义的短期时间是多少,我们可以保存大半年,复苏的细胞状态也很好的,我们的冻存液是配完接着就用的。

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发表于 2015-9-23 16:55:18 | 显示全部楼层
配制80%血清+20%DMSO冻存液,细胞用血清重悬,再缓慢加入等体积冻存液,混匀即可

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发表于 2015-9-23 20:45:50 | 显示全部楼层
请问你的细胞是哪种细胞,正常的还是肿瘤细胞,

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 楼主| 发表于 2015-9-24 13:04:43 | 显示全部楼层
曾宝真 发表于 2015-9-23 20:45
请问你的细胞是哪种细胞,正常的还是肿瘤细胞,

正常细胞

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发表于 2015-9-24 23:47:38 | 显示全部楼层
珍贵的难养的细胞胎牛血清的浓度可以加高一些,比较好养的细胞,血清浓度低一些是可以的,细胞状态也比较好,要不有点浪费血清哦,

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发表于 2015-9-24 23:49:05 | 显示全部楼层

珍贵的难养的细胞胎牛血清的浓度可以加高一些,比较好养的细胞,血清浓度低一些是可以的,细胞状态也比较好,要不有点浪费血清哦,

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发表于 2015-9-27 20:23:37 | 显示全部楼层
一个同学的实验室肺癌细胞的冻存液的配制方法是95%的完全培养基+5%的DMSO,

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 楼主| 发表于 2015-9-28 17:10:18 | 显示全部楼层
曾宝真 发表于 2015-9-24 23:47
珍贵的难养的细胞胎牛血清的浓度可以加高一些,比较好养的细胞,血清浓度低一些是可以的,细胞状态也比较好 ...

嗯,好的,谢谢大神!
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