查看: 1706|回复: 5

【求助】Huh7细胞培养方法

[复制链接]

25

主题

31

帖子

567

积分

管理员

Rank: 9Rank: 9Rank: 9

积分
567
发表于 2015-8-2 13:43:29 | 显示全部楼层 |阅读模式
我做实验要用Huh7细胞,经验不足,细胞数量有限, 请教各位大侠Huh7细胞的培养方法,请赐教,谢谢


本帖子中包含更多资源

您需要 登录 才可以下载或查看,没有帐号?立即注册

x

41

主题

57

帖子

133

积分

注册会员

Rank: 2

积分
133
发表于 2015-10-10 23:47:52 | 显示全部楼层
人肝癌细胞 HuH-7细胞  传代方法:
1.悬浮生长细胞传代
离心法传代:离心(1000转/分)去上清,沉淀物加新培养液后再混匀传代。
2.半悬浮生长细胞传代(Hela细胞)
此类细胞部分呈现贴壁生长现象,但贴壁不牢,可用直接吹打法使细胞从瓶壁脱落下来,进行传代。
3.贴壁生长细胞传代
采用酶消化法传代。常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。
      传代培养中的细胞传代培养(subculture),当原代培养成功以后,随着培养时间的延长和细胞不断分裂,一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止;另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。此时就需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养。这个过程就称为传代(passage)或者再培养(subculture)。对单层培养而言,80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段.
       传代培养是组织培养常规保种方法之一。也是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶,细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行,每一步都需要认真仔细的无菌操作。

14

主题

82

帖子

456

积分

实习版主

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
456
发表于 2015-10-11 09:52:07 | 显示全部楼层
赞一个!大神!

1

主题

4

帖子

17

积分

新手上路

Rank: 1

积分
17
发表于 2015-10-11 19:12:26 | 显示全部楼层
是用DMEM高糖+10%FBS来养么,对FBS都有什么要求呢,国产的可以么

14

主题

82

帖子

456

积分

实习版主

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
456
发表于 2015-10-12 20:47:32 | 显示全部楼层
是的,FBS国产的不好说,有差的又好的,建议用进口的,

19

主题

65

帖子

427

积分

实习版主

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
427
发表于 2015-10-21 17:09:24 | 显示全部楼层
国产四季青无内毒素挺好的!
您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册

本版积分规则

快速回复 返回顶部 返回列表